化学发光免疫分析(Chemiluminescence Immunoassay, CLIA) 是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。

该技术主要分为免疫反应和化学发光系统两个方面。免疫反应主要指抗原和抗体结合;而为了能让这种结合定量的被检测出来，从而引入了化学发光系统：将化学发光物质标记在抗原(抗体)上，或用酶作用于化学发光底物。在催化和氧化作用下，化学发光物质被激发从基态达到激发态，而该种状态并不稳定，发光物质会重新回到基态，同时释放光子。由于光信号的强弱与待测物浓度在一定范围内呈线性关系，因此在光学检测系统的帮助下，可以对光信号进行定量检测，从而确定待测物含量。

(1)灵敏度高：理论上化学发光最高灵敏度可达到10^-18 mol/L，正常灵敏度可达 10^-16 mol/L，可检出酶联免疫分析无法检出的物质，对早期诊断有重要意义。

(2)检测时间短：每个样本测量光信号时间不超过几秒，从加样到得出分析结果可在9-60分钟之内完成。

(3)检测范围宽：理论上线性量程范围最大可达105个相对发光单位(RLU)，即5个数量级。这与酶免分析吸光度(OD值)2 个量级的范围相比，优势明显。

(4)精确的定量检测：光信号强度和待测物质浓度呈线性关系，根据仪器的标准曲线，精确算出待测物浓度。酶联免疫通过灰度分析，通常结果只用来做定性或半定量分析，或精度要求不太高的检测。

(5)结果稳定，误差小：化学发光技术样本本身发光，不需要额外光源，避免了外来因素的干扰(光源稳定性、光散射、光波选择器)，分析结果稳定可靠。

(6).操作简便：光信号持续时间长，绝大多数分析测定仅需加入一种试剂，简化了实验操作。

按其标记物的不同，化学发光可以分为直接化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析。三种方法各有特点，均为目前主流的化学发光方法。

技术等级层面看，电化学发光等级最高，直接化学发光次之，酶促化学发光等级最低;三种化学发光技术各具特色，不存在替代关系，在不同的应用上体现着各自的优势。

按照发光持续时间，化学发光又可以分为闪光(Flash)和辉光(Glow)。

闪光型发光时间在数秒内，如吖啶酯系统、异鲁米诺系统。其检测方式一般采用原位进样和时间积分法测量，即在检测器部位加装进样器，并保证加入发光剂和检测2个过程同步进行;同时以整个发光信号峰的面积为发光强度。

辉光型发光时间在数分钟至数十分钟以上，如HRP-鲁米诺系统、ALP-AMPPD系统等。其信号检测无需原位进样，一般以速率法测量，即在发光信号相对稳定的区域(坪区)任意点测量单位时间的发光强度。

闪光与辉光及其测量方法的差别

电化学发光，发光强度较大，大概0.2s-0.6s即可达峰值，发光持续时间可由电压控制。

来源：IVD分享库

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